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      土壤脲酶 (S-UE) 活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

      提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大小:
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      相關(guān)產(chǎn)品:
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      詳細(xì)介紹

      壤脲酶 (S-UE) 活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

      量法

      意:正式測(cè)定之前選擇預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

      規(guī)格:100T/48S

      產(chǎn)品內(nèi)容

      試劑一: 甲苯2mL×1  瓶,4℃保存;  (自備)

      劑二:粉劑×1  瓶,臨用前加入9mL  蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保 

      三:液體19mL×1  瓶,4℃保存;

      劑四A  液:液體0.4mL×1  支,4℃保存;

      試劑四B  液:液體1.6mL×1  瓶,4℃保存;臨用前將A  液倒入B  液中混合,待用;用不完的試 4℃保存一周

      五:液體 2mL×1  瓶,4℃保存;

      標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,1mg/mL 氮標(biāo)準(zhǔn)液。

      產(chǎn)品說(shuō)明:

      S-UE水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、

      全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶 尿素產(chǎn)生的NH3-N

      自備的儀器和用品:

      可見(jiàn)分光光計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96  孔板、研缽、冰、甲苯 (不允許快遞) 和蒸餾水。

      作步驟:

      a.    培養(yǎng)


      測(cè)定管

      對(duì)照管

      風(fēng)干土樣(g)

      0.05

      0.05

      劑一 (μL)

      20

      20

      混勻,使土樣全部濕潤(rùn),室溫放置 15min

      劑二 (μL)

      90


      餾水 (μL)


      90

      劑三 (μL)

      190

      190

      混勻,入 37℃水浴培養(yǎng) 24h  后, 10000g  常溫離心 10min ,取上清液。

      b.    培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋10 倍 (取0. 1mL  上清液,加入0.9mL  蒸餾水) 。若最終計(jì)算得到的 ΔA仍大于0.5繼續(xù)稀釋。

      c.     標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備:吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,稀釋至10 0.5 0μg/mL


      d.    測(cè)氨量 (在微量玻璃比色皿或96 孔板中加入下列試劑)


      測(cè)定管

      對(duì)照管

      標(biāo)準(zhǔn)管

      釋后的上清液 (μL/標(biāo)準(zhǔn)品

      80

      80

      80

      劑四 (μL)

      15

      15

      15

      劑五 (μL)

      15

      15

      15

      分混勻,室溫放置 20min

      餾水 (μL)

      90

      90

      90

      混勻,于 630nm 處,蒸餾水調(diào)零,讀吸光值 A ,計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一 個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度 (y) 和吸光度 ( x,減去濃度為 的空白管) ,做標(biāo) 準(zhǔn)曲線(xiàn)。

      酶活力計(jì)算

      據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),將ΔA帶入公式 (x ) 計(jì)算測(cè)定中樣品的濃度 (μg/mLy值。 的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生gNH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。

      脲酶活力 (U/g  土樣) =y×10×V反總÷W÷T=60×y

      10:稀釋倍數(shù);T :反應(yīng)時(shí)間,1dV反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mLW:樣本質(zhì)量,0.05g

      從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶(hù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年,是您值得信賴(lài)的科研合作伙伴!

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